技術(shù)參數(shù) 參數(shù)測定指標(biāo)靈敏度:MS模式1pg利血平,(M+H)+m/z609.2807;LC/MS400 L/minLC/MS400 L/min10:1RMS靈敏度:MS/MS模式1pg利血平(174,195,397,448m/z);LC/MS400 L/min50:1RMS(typical200:1RMS)靈敏度:MS模式NanoflowChipMS,300nL/min500attomoleofBSApeptide digest(200attomole-typical)15%coverageinproteindatabase search(PMF)靈敏度:MS/MS模式NanoflowChipMS,300nL/min100fmol/ulGlu-fibpeptide50:1RMS分辨率 20,000FWHM質(zhì)量準(zhǔn)確度:MS模式利血平(M+H)+(m/z609.2807) 20pgLC/MS,400 L/min 2ppm質(zhì)量準(zhǔn)確度:MS/MS模式利血平m/z609?39720pg LC/MS,400 L/min 5ppm質(zhì)量準(zhǔn)確度:MS模式Infusionusingnanoflow ChipMS300nL/minGlu-fibpeptide(M+2H)++(m/z785.83) 2ppm質(zhì)量準(zhǔn)確度:MS/MS模式Infusionusingnanoflow ChipMS300nL/minGlu-fibpeptide,m/z 785.83---- 684.35/480.26 5ppm譜內(nèi)動(dòng)態(tài)范圍 105質(zhì)量范圍 m/z25 20,000光譜采集速率:MS模式 20spectra/second光譜采集速率:MS/MS模式 10MS/MSspectra/second 主要特點(diǎn) 儀器主要特點(diǎn):1.靈敏度 噴射流離子聚焦離子化技術(shù),在提高霧化溫度的同時(shí),提高了電場密度,使離子化效率得以顯著提升,并有效屏蔽基質(zhì)干擾;此外,在高速鞘氣流的作用下,離子云密度明顯增加(離子聚焦),進(jìn)而提高質(zhì)譜取樣效率;這些技術(shù)的進(jìn)步,從離子生成和傳輸過程提高了質(zhì)譜檢測的靈敏度;同時(shí),該離子源可在0.1~2.5mL/min的流速下操作,使其應(yīng)用范圍進(jìn)一步擴(kuò)大; 芯片液相色譜技術(shù),安捷倫獨(dú)有的,業(yè)內(nèi)最先進(jìn)的納流液相色譜。將納流分離與電噴霧離子化過程合二為一,完全消除管線連接等因素造成的柱外體積擴(kuò)散;同時(shí),在芯片上可以同時(shí)完成樣品的富集、純化和分離,從根本上有效解決了微量樣品的進(jìn)樣以及痕量成分的高靈敏分離分析; 經(jīng)惰性處理的鍍白金離子傳輸毛細(xì)管,消除電荷蓄積作用,同時(shí)保證在極性切換過程中不損失離子;安捷倫專利的RF離子透鏡顯著提高高質(zhì)量端的離子傳輸;高效真空系統(tǒng)提高了離子平均自由程,將離子在傳輸過程中的損耗降低到最低;上述技術(shù)的綜合運(yùn)用,全面保證了離子傳輸效率的最大化,從而顯著提高靈敏度; 采用高頻、小口徑八極桿,更有效地聚焦離子成束,有助于MS/MS的高靈敏的采集; 采用線性加速的高能碰撞六極桿反應(yīng)池,有效消除背景噪音和 記憶效應(yīng) ,從而保證了痕量樣品快速、準(zhǔn)確的分析結(jié)果。2.準(zhǔn)確度 精良的溫度控制:安捷倫QTOF系列產(chǎn)品采用真空夾套雙層飛行管設(shè)計(jì),并使用目前世界上熱膨脹系數(shù)最低的合金材料制造,有效防止了外部環(huán)境溫度變化對(duì)飛行管道的影響;此外,所有高壓元件,均有嚴(yán)格的溫度控制和屏蔽系統(tǒng),進(jìn)而從儀器內(nèi)部消除了溫度波動(dòng)的干擾;因此,安捷倫QTOF系列產(chǎn)品可以在常規(guī)環(huán)境下,保持質(zhì)量軸的穩(wěn)定性,顯著方便了儀器的使用和維護(hù); 自動(dòng)調(diào)諧:配合調(diào)諧溶液自動(dòng)輸送系統(tǒng),軟件控制的自動(dòng)調(diào)諧,操作簡便,無需其它裝置或手工操作;多種調(diào)諧模式,保證儀器穩(wěn)定、準(zhǔn)確的狀態(tài); 同步實(shí)時(shí)校正:在液相色譜液流輸入的同時(shí),參比離子經(jīng)虹吸管路揮發(fā)進(jìn)入噴射流離子聚焦離子源或芯片液相色譜離子源,不干擾待測成分的離子化過程,但可以和樣品離子同時(shí)進(jìn)入質(zhì)譜系統(tǒng)得到檢測,從而完成實(shí)時(shí)參比校正。3.采樣速率、動(dòng)態(tài)范圍和質(zhì)譜分辨率 信號(hào)處理采用模數(shù)轉(zhuǎn)換器(ADC):帶雙增益微處理器的ADC完全消除了TDC所固有的信號(hào)飽和、響應(yīng)死時(shí)間等缺陷,無需進(jìn)行信號(hào)預(yù)衰減,即可準(zhǔn)確記錄實(shí)時(shí)的、實(shí)際的離子強(qiáng)度,無信號(hào)丟失可能,從而達(dá)到105的譜內(nèi)動(dòng)態(tài)范圍。這樣,只需一次進(jìn)樣分析,就可以準(zhǔn)確測定樣品中,具有顯著濃度差異的各個(gè)成分;同時(shí),使得用MS和MS/MS數(shù)據(jù)進(jìn)行定量分析成為完全可行; 6530QTOFMS采用的4GHzADC,每0.25ns采集一次信號(hào)強(qiáng)度,從而更精密地記錄離子到達(dá)檢測器產(chǎn)生的信號(hào),并由此提高質(zhì)譜分辨率,尤其對(duì)低質(zhì)量端的分辨率的提升更為顯著;同時(shí),隨著分辨率的提高,使得質(zhì)量準(zhǔn)確度也得到進(jìn)一步提高;尤其值得關(guān)注的是,隨著分辨率的提高,質(zhì)譜檢測靈敏度沒有任何損失; 6530QTOFMS的ADC所配備的數(shù)字電路的數(shù)據(jù)傳送速度可達(dá)到32gigabit/sec,從而保證了質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行快速采樣的需求;現(xiàn)代液相色譜技術(shù)已趨于分離度更高,分離時(shí)間更短,相應(yīng)得到的色譜峰寬也越來越窄,通常情況下,由亞2微米色譜柱及納流芯片液相色譜獲得的色譜基線峰寬只有0.5~10s,因此,與之聯(lián)機(jī)的質(zhì)譜系統(tǒng)的采樣速率就成為獲得高質(zhì)量圖譜的關(guān)鍵。6530QTOFMS可達(dá)到20spectra/sec,以及10MS/MSspectra/sec的采樣速率,與快速液相分離完全匹配。4.靈活、廣泛的應(yīng)用6530QTOFMS除了可以配置噴射流離子聚焦離子源和芯片液相色譜,還可以和安捷倫的其它多種離子源配合使用,滿足多領(lǐng)域、多用途的需求。軟件特點(diǎn):一臺(tái)好的儀器,還需要通過高效的軟件系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集、數(shù)據(jù)分析等實(shí)際操作,從而完成儀器本身所具備的各項(xiàng)功能。安捷倫6530QTOFMS配備了增強(qiáng)版的MassHunterWorkstation,針對(duì)QTOFMS的應(yīng)用,MassHunterWorkstation所具有的特色功能,及其優(yōu)勢列表如下: 特色功能優(yōu)勢MS/MS的數(shù)據(jù)采集: 動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)MS/MS采集時(shí)間 包括/排除特殊離子在有限的出峰時(shí)間內(nèi),可對(duì)更多的前體離子采集二級(jí)質(zhì)譜,并且保證有針對(duì)性地選擇前體離子;特別有助于獲得高質(zhì)量的低豐度前體離子的二級(jí)質(zhì)譜;有利于對(duì)小分子化合物的鑒別,提高蛋白組學(xué)研究中的序列覆蓋率。分子特征提取功能(molecularfeature extraction,MFE): 從原始數(shù)據(jù)中自動(dòng)識(shí)別并扣除化學(xué)噪音 將來源于同一個(gè)化合物的質(zhì)譜信號(hào)(同位素、加合離子、多價(jià)離子、多聚體等)及保留時(shí)間和信號(hào)強(qiáng)度整合為一個(gè)數(shù)據(jù)從復(fù)雜背景中,提取整合出有效的信號(hào);從數(shù)據(jù)分析的角度,提高檢測靈敏度;快速、高效地發(fā)現(xiàn)目標(biāo)成分,提高分析數(shù)據(jù)的質(zhì)量;尤其有利于從復(fù)雜基質(zhì)中檢定微量化合物,包括大分子和小分子物質(zhì)。分子式計(jì)算: 同位素比例的計(jì)算和評(píng)分 基于質(zhì)量虧損(MassDefect)的數(shù)據(jù)過濾和評(píng)分 加合離子信號(hào)參與對(duì)分子式的評(píng)分 碎片離子的分子式計(jì)算 中性丟失的分子式計(jì)算 分子式自動(dòng)確認(rèn) 數(shù)據(jù)庫檢索根據(jù)同位素質(zhì)量準(zhǔn)確度和同位素比值的計(jì)算結(jié)果,進(jìn)一步提高對(duì)分子式的確認(rèn)度;根據(jù)質(zhì)量虧損范圍,提高分子式確認(rèn)的針對(duì)性;加合離子信號(hào)的準(zhǔn)確度參與分子式評(píng)分,增加確認(rèn)度;提供碎片離子和中性丟失的分子式,可以幫助進(jìn)一步確認(rèn)化合物分子式,同時(shí)也提供更多的結(jié)構(gòu)分析信息;分子式自動(dòng)確認(rèn)功能可幫助用戶從復(fù)雜基質(zhì)中,快速篩查、確認(rèn)目標(biāo)化合物;數(shù)據(jù)庫檢索幫助用戶更加快速高效地鑒別樣品中可能存在的化合物。多種數(shù)據(jù)輸出格式:MGF(Mascot),JCAMP,MZxml,andMZml.Compoundsummarycsv便于用戶使用其它軟件,進(jìn)行更專門的數(shù)據(jù)計(jì)算或比對(duì)。定量方法開發(fā)功能用戶可采用MS和MS/MS建立定量分析方法,快速、簡便,有效提高工作效率。多種附加應(yīng)用軟件 SpectrumMillMSProteomicsWorkbench:蛋白組學(xué)研究必不可少。 Bioconfirmationsoftware:生物大分子分析軟件。 MetaboliteIdentificationsoftware:代謝物鑒定軟件,用于藥物代謝物的發(fā)現(xiàn)和鑒定。 MassProfilingsoftwareandGenespringMSsoftware:質(zhì)譜數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件,用于生物標(biāo)記物(Biomarker)的發(fā)現(xiàn),代謝組學(xué)和蛋白組學(xué)研究不可或缺的工具。儀器介紹融合了安捷倫公司最新開發(fā)的噴射流離子聚焦離子化技術(shù)和至尊高精度四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)的安捷倫6530QTOFMS,將質(zhì)譜檢測的準(zhǔn)確度、靈敏度、分辨率、譜內(nèi)動(dòng)態(tài)范圍和掃描速度都提升到了業(yè)界同類儀器的最新高度,業(yè)已成為世界上質(zhì)量準(zhǔn)確度最好,靈敏度最高的四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀。廣泛應(yīng)用于蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、食品安全、環(huán)境分析、雜質(zhì)分析、代謝物鑒定等多個(gè)領(lǐng)域。