血液中乙醇含量頂空氣相色譜法測定/血液成分含量測定專用分析儀浙江(杭州)
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血液中乙醇含量頂空氣相色譜法測定 南京科捷分析儀器:025-83312752
血液中乙醇含量頂空氣相色譜法測定 目的 建立檢測血液中乙醇含量簡便、準確的方法。方法 以叔丁醇作為內標,用頂空氣相色譜火焰離子化檢測器對樣品進行檢測,與平行操作的乙醇標準品比較,用內
目的建立檢測血液中乙醇含量簡便、準確的方法。方法以叔丁醇作為內標,用頂空氣相色譜火焰離子化檢測器對樣品進行檢測,與平行操作的乙醇標準品比較,用內標法以乙醇對內標物的峰面積比進行定量。結果色譜圖上目標峰與內標峰分離完全,在0.01~10.0g/L范圍內標準工作曲線線性關系良好。結論頂空氣相色譜法測定血液中乙醇含量快速靈敏,能準確定量。該方法可用于實際檢測分析。
液中乙醇含量頂空氣相色譜關鍵詞:血液乙醇含量測定氣相色譜儀頂空進樣器
血液中乙醇濃度的高低,是判定一個人清醒程度的重要指標。目前國內大多采用國標法測定,即重鉻酸鉀氧化硫酸亞鐵銨滴定法。該法花費時間長,條件不易控制。由于血液中含有各種蛋白質和膠狀物質,比較黏稠,因此不能采用直接氣相色譜法測定。本實驗采用頂空氣相色譜法,通過對待檢血樣進行適當處理和色譜條件的摸索,從而對實驗方法有所改進。 血液中乙醇含量頂空氣相色譜法測定/血液成分含量測定專用分析儀浙江(杭州)
1 液中乙醇含量頂空氣相色譜分析材料和方法
1.1 主要儀器 南京科捷分析儀器有限公司GC5890F型氣相色譜儀,DK-300型半自動頂空進樣器,KJ5890色譜工作站。
1.2 試劑 空白抗凝血,無水乙醇(色譜純),叔丁醇(色譜純,內標物)。
1.3 試劑配置
1.3.1
1.3.2 乙醇標準工作液、叔丁醇標準工作液 分別吸取一定量的乙醇標準儲備液和叔丁醇標準儲備液,用蒸餾水稀釋10倍,分別得濃度為1g/L的乙醇標準工作液和叔丁醇標準工作液
1.4 色譜條件和頂空條件 色譜柱毛細管色譜柱,柱溫80℃,檢測室溫度220℃,進樣溫度200℃.頂空樣品溫度80℃,閥體溫度90℃,樣品管路溫度90℃。
1.5 樣品制備 精確吸取2份待測全血0.5ml,分別加入樣品瓶中,加100 l(1g/L)叔丁醇標準工作液作為內標,用密封鉗加封鋁帽,密封好瓶塞,混勻,放入DK-300頂空進樣器加熱位里面。
另取空白全血2份,根據(jù)待測血液中乙醇含量的多少(目測乙醇峰面積的大?。?,添加相應的乙醇標準工作液(20 g~2mg),內標液按上述方法平行操作,作為已知對照。
1.7 標準曲線的制作 將10g/L的乙醇標準儲備液用重蒸水分別稀釋10、100、1000倍,得濃度分別為1、0.1、0.01g/L的乙醇標準液,然后分別取0.05、0.1、0.2、0.4ml的1g/L乙醇標準液,0.1、0.2ml的0.1g/L乙醇標準液,0.1、0.2ml的0.01g/L乙醇標準液,同時加入0.2ml的1g/L叔丁醇標準工作液做內標,檢測后制作標準工作曲線。
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y=1.4062x+0.0268,r=0.999
計算檢材中醇含量W(g/100ml)
W=f 檢材中的醇峰面積平均值 內標添加量( g) 100檢材中內標峰面積平均值 檢材量 1000
f=空白檢材中醇添加量 內標峰面積平均值空白檢材中內標添加量 醇峰面積平均值
計算相對相差(用來檢驗平行操作的穩(wěn)定性及數(shù)據(jù)的可靠性):
相對相差(%)=|W1-W2|W 100
式中W1、W2為2份檢材平行定量測定的結果,W為2份檢材平均值。
2 液中乙醇含量頂空氣相色譜分析結 果
2.1 測定的色譜圖 見圖1、2。
該條件下目標峰與內標分離完全,(3.39 0.5)min處為乙醇目標峰,(10.0 0.5)min處為內標峰。
2.2 線性關系 在確定的最佳試驗條件下,對不同濃度的乙醇標準工作液進行測定,其回歸方程為y=1.4062x+0.0268,r=0.999。在乙醇濃度為0.01~10.0g/L范圍內,血液中乙醇含量與相應的峰面積值呈良好的線性關系,測定限為0.01g/L。
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